不对成转录:即不永远在同一DNA单链上!!
RNA依赖的RNA合成,也称RNA复制
模板链
携带遗传性息的为编码链
不需要引物,可直接在转录起点处使两个核苷酸间形成磷酸二脂键!!
Mg²⁺辅助
亚基数:2个,功能:决定哪些基因被转录
一个,转录过程有关(催化)
一个,结合DNA模板(开链)
一个,ß'折叠和稳定性;ó募集
一个,辨认起始点,结合启动子
若干个基因的编码区
启动子:是RNA pol 结合模板DNA的部位,也是决定转录起始点的关键部位
-35区(Pribnow 盒):识别位点
-10区:结合位点
终止子等
DNA双链闭合
起始和延长中,DNA双链解开的范围只有17bp左右,比复制叉小
以GTP或ATP较为常见,生成聚合物5’-pppGpN-OH-3‘端的游离羟基,
形成转录起始复合物(ó亚基脱落)
“转录泡”
羽毛状:保证转录和翻译都以高效率运行,满足它们快速增值的需要。
原核生物转录终止分为依赖p因子与非依赖p因子两大类
结合富含polyC上,RNApol构象改变,使RNApol的移动停顿
RNA 脱落
再加工成28S,18S,5.8S的rRNA
转录生成前体RNA(hnRNA),lncRNA,piRNA,miRNA
5SrRNA,tRNA和snRNA6
耐受
极敏感
中度敏感
Tyr(酪氨酸)-Ser-Pro-Thr(苏氨酸)-Ser-Pro-Ser
转录后处于磷酸化状态
待续……
顺式作用元件和转录因子在真核生物转录起始中有重要作用
顺式作用元件:转录起始点上游可以有不同的DNA序列
起始点至上游-37pb区,TATA序列(Hognest盒或TATA盒)
CAAT盒,GC盒等
远隔序列
RNA pol II启动转录时,需要称为转录因子的蛋白质
反式作用因子:能直接或间接辨认和结合转录上游区段DNA或增强子的蛋白质
通用转录因子(基本转录因子):高度保守
特异性转录因子
TATA盒结合蛋白(TBP)
TBP相关分子(TAF),辅激活因子
辅助加强TBP与DNA的结合
结合 TF II D,稳定它;介导RNA pol II的募集
募集H;结合单链DNA,稳定状态
结合pol II 并随其进入转录延长阶段,防止其与DNA接触!?
解旋酶和ATPase酶活性;蛋白激酶参与CTD的磷酸化
待续……
待续……
可观察到核小体移位和解聚现象
转录不在ploy(A)的位置上终止
可读框下游:有一组共同序列AATAAA,再下游有相当多的GT序列
转录终止的修饰点
真核前体mRNA经首,尾修饰,剪接和编辑加工后才能成熟
在催化的新生RNA在长度达25~30个核苷酸时,其5‘-端的核苷酸就与7-甲基鸟嘌呤核苷通过不常见的5’,5‘-三磷酸连接键相连!!
磷酸酶活性
鸟苷酸转移酶活性
由S-腺苷甲硫氨酸(SAM)提供甲基
避免核酸酶的攻击
前体mRNA在3’-端特异位点断裂并加上多聚腺苷酸尾
与AAUAAA序列结合成不稳定复合体
断裂激动因子(CStF)
断裂因子(CF I和CF II)
结合CPSF-RNA复合体成稳定的复合体
结合上一复合体
聚合腺苷酸(12个,慢,)
提高PAP的速度
A尾足够长时,使PAP停止作用
内含子形成套索RNA被剪除
内含子在剪接接口处剪除
没有能量的消耗
5种核小RNA(snRNA,高度保守)
剪接体的装配需要ATP的供能
前体mRNA分子有剪切和剪接两种模式
增加生物蛋白质多样性机制之一
免疫球蛋白
同一种前体mRNA分子在大鼠甲状腺内产生降钙素,而在脑内产生降钙素-基因相关肽(CGRP)
RNA编辑:有些基因的蛋白质产物的氨基酸序列与的初级转录序列并不完全对应,mRNA上的一些序列在转录后发生了改变
在肝脏合成的 apo B100,4536个氨基酸残基
在小肠黏膜细胞合成的 apo B48, 2152个氨基酸残基
存在一种胞嘧啶核苷酸脱氨酶,将CAA→UAA,变成终止密码子
待续……
待续……
核酶的发现
待续……
抗生素——利福平可以特异性抑制原核生物的RNA pol,特异性结合ß亚基
SSB
Dna B