人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质,是进行微生物培养的物质基础
用于工业生产,不能形成菌落
加入凝固剂(一般为琼脂),用于实验鉴定,可以形成菌落
观察微生物的运动
注:菌落是指由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体
成分不明确,用于大规模生产
成分明确,用于科研鉴定
选择培养基:在培养基中加入或减少某种成分,使其只能生长特定的微生物(例:加入抗生素的培养基;加入高浓度的食盐,只能生长金黄色葡萄球菌;去掉碳源的培养基,培养自养型微生物;去掉氮源的培养基,培养固氮微生物;以纤维素为唯一碳源的培养基,培养能够分解纤维素的微生物;以尿素为唯一氮源的培养基,培养分解尿素的细菌)
鉴别培养基:加入某种指示剂,根据颜色反应来鉴别是否存在某种微生物(例:加入伊红美蓝的培养基可以把大肠杆菌的菌落染成黑色;以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,指示剂变红,可以鉴别该种细菌可以分解尿素;加入刚果红的培养基,菌落周围出现透明圈,说明该细菌可以分解纤维素)
通用培养基(例:牛肉膏,蛋白膝)
水、碳源、氮源、无机盐、特殊营养物质
注意:培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素;培养霉菌时需要将培养基的pH调至酸性;培养细菌时需将pH调至中性或微碱性
获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵,注意几点:
对实验操作的空间、操作者的衣着和手,进行清洁和消毒。
将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌。
为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在酒精灯火焰附近进行。
实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触
计算→称量→溶化→灭菌→倒平板
平板划线法:从第一区域划线的末端开始往第二区域内划线,重复以上操作,在三、四、五区域内划线(注意不能将最后一区的划线与第一区相连)
稀释涂布平板法︰将菌液进行一系列梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养(用于计数,一般选择菌落数在30-300的平板进行计数)纤维素
临时保存
4℃
长期保存
零下20摄氏度
纤维素酶是一种复合酶:C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶,前两种酶使纤维素分解成纤维二糖,第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖
刚果红是一种染料,可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物,但不会和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应,可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌
高二生物选修一