动物细胞融合定义:使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞。
原理:细胞膜的流动性
物理法:电融合法
化学法:聚乙二醇(PEG)
灭火是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力,但并不破坏他们的抗原结构。
动物细胞融合实质及完成的标志:细胞核的融合
结果:形成杂种细胞 (融合后的杂交细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息)
意义:突破了有性杂交的局限,使远缘杂交成为可能。
应用:主要用于制备单克隆抗体
定义:机体受抗原刺激后产生的,能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。
浆细胞产生需抗原刺激,发生免疫应答
免疫应答能产生多种浆细胞,每种浆细胞能产生一种抗体。
已经高度分化,不能再分裂
抗体的分布:1)血清(主要)2)组织液及外分泌液(如乳汁中)
肿瘤细胞:具有无限增殖的能力。
应用到的技术:动物细胞融合、动物细胞培养
原理:细胞膜具有一定的流动性、细胞增殖
仅有"AB"得以生长,其余细胞死亡
每一个孔中尽量只接种一个细胞
获得大量AB
筛选出能够分泌所需抗体的细胞。
抗原-抗体杂交:分泌的抗体能与特定抗原结合
单克隆抗体能准确识别抗原细微差异,与特定抗原发生特异结合。
如:单克隆抗体+同位素(荧光标记)
(在特定组织中成像的技术,可定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病。)
ADC通常由抗体、接头和药物(如细胞毒素)三部分组成。
抗体:导向作用(靶向作用)。
即通过特异性结合靶细胞表面的抗原, 将连接的药物输送到靶细胞。
药物:治疗作用,如细胞毒素杀伤肿瘤细胞
治疗疾病 抗体自身也能治疗疾病。
定义:动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中,使这个重新组合 的细胞发育成新胚胎,继而发育成动物个体的技术。(用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。)
原理:动物细胞核的全能性
生殖方式:无性生殖
细胞分化程度低,全能性容易表现
细胞分化程度高,全能性难以表现
应用到的技术:细胞核移植、动物细胞培养、细胞融合、早期胚胎培养、胚胎移植
卵母细胞:①细胞体积大,易操作;②其细胞质中含有激发细胞核全能性表达的物质和营养条件。
“去核”:保证克隆动物的核基因全部来自 供体细胞。
去核方法是显微操作法。也有人采用梯度离心、紫外线短时间照射和化学物质处理等方法。这些方法是在没有穿透卵母细胞透明带的情况下去核或使其中的DNA变性。
整个供体细胞注入优点:①对卵母细胞损伤较小;②保证供体细胞的细胞核不被破,坏操作方便。
克隆动物细胞核的遗传物质来自供体动物,但细胞质中的遗传物质同时来自供体细胞和受体卵母细胞;此外生物性状还受环境因素的影响。
加速家畜遗传改良进程、促进优良畜群繁育。
转基因克隆动物作为生物反应器生产医用蛋白; 器官移植供体
疾病模型 ;分析致病基因;了解衰老过程
保护濒危物种