植物细胞的全能性:植物细胞经分裂和分化后,仍然具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的潜能
将离体的植物器官组织或细胞等,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其形成完整植株的技术
不定型的薄壁组织团块
生长素↑根
细胞分裂素↑芽
将不同来源的植物体细胞,在一定条件下融合成杂种细胞,并把杂种细胞培育成新植物体
打破生殖隔离,实现远缘杂交育种,培育植物新品种
获得原生质层
电容合法
离心法
聚乙二醇 (PEG) 融合法
高 — 高 pH 融合法
形成愈伤组织,诱导发育成完整植株
高效快速实现种苗的大量繁殖
保持优良品种的遗传特性
观赏植物/经济林木/无性繁殖作物/濒危植物等,如甘蔗,桉树,铁皮石斛等
马铃薯/草莓/香蕉等易传染给后代病毒的无性繁殖作物
切取分生区 (如茎尖) 进行组织培养获得脱毒苗
分生区病毒极少,甚至无病毒
单倍体育种
突变体的利用
获取次生代谢物(非植物基本的生命活动所必需的产物)
从动物体中取出相关的组织,将他分散成单个细胞,然后再适宜的培养条件下,让这些细胞生长和繁殖的技术
糖类、氨基酸、无机盐、维生素…
血清等
灭菌处理用具,无菌条件下操作
定期更换培养液以清除代谢物
哺乳动物 (36.5±0.5)℃
7.2~7.4
渗透压
通常为 95%空气+5%二氧化碳 的混合气体
通常会由于密度过大、有害代谢物积累、营养物质缺乏等因素分裂受阻
贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,通常会停止分裂增殖
机械方法
胰蛋白酶
胶原蛋白酶
转入培养液进行原代培养
转入培养箱培养
分散到多个培养液进行数次传代培养
早期胚胎中,具有分化为任何一种类型细胞的能力的细胞
成体干细胞
诱导多功能干细胞
使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞
融合后的杂交细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息
小鼠注射特定抗原后,获取能产生特定抗体的B淋巴细胞
培养骨髓瘤细胞
诱导 骨髓瘤细胞(A) 和 B淋巴细胞(B) 融合
PEG 融合法
电融合法
灭活病毒诱导法
A
AA
既能大量增殖
又能产生抗体
BB
B
仅有"AB"得以生长,其余细胞死亡
获得大量AB
筛选出能够分泌所需抗体的细胞
每一个孔中尽量只接种一个细胞
注射到小鼠腹腔内
或者体外培养
从小鼠腹水或培养液中获得大量单克隆抗体
将动物的一个细胞的细胞核一如去核的卵母细胞中,使这个重新组合的细胞发育成新胚胎,继而发育成动物个体
牛的卵巢中采集卵母细胞,体外培养到MⅡ期
显微操作去核
从供体高产奶牛身体的一部分上取得体细胞,进行培养
将供体细胞注入去核的卵母细胞
电融合法融合,使供体核进入卵母细胞,形成重构胚
电刺激
钙离子载体
乙醇
蛋白酶合成抑制剂
将胚胎移入受体 (代孕) 母牛体内
生出与供体奶牛遗传物质基本相同的犊牛