定义：基因工程是按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因的技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
优点：{1}定向改造生物性状（目的性强）；{2}克服远缘杂交的不亲和性
别名：基因拼接技术或DNA重组技术
原理：基因重组
操作环境：生物体外
操作水平：DNA分子水
操作对象：基因
结果：创造出符合人们需要的生物类型和生物产品
简称：限制酶
来源：主要来源于原核生物（是一类酶的总称）
作用：断开磷酸二酯键
识别双链DNA分子特定核苷酸序列
一般为4~8个的核苷酸，常见6个核苷酸。
切割特定位点，断开磷酸二酯键
结果：形成黏性末端（中心轴线两侧切开）或平末端（中心轴线处切开）
不切割自身的原因：原核生物中不存在该酶的识别序列， 或识别序列已被修饰（甲基化）。
原核生物中存在限制酶的意义：
切割外源DNA以保证自身安全，防止外来病原物的危害。
选择目的基因两侧酶切割位点→保证目的基因的完整
选择两端切点不一致（酶A+B）→防止目的基因自身环化
获取一个目的基因需限制酶切割 2次,共产生4个游离的磷酸基团。
保留标记基因→便于基因筛选
选择与目的基因相同的限制酶→保证具有相同的黏性末端。
双酶切可防止质粒恢复原状、确保目的基因与质粒的定向连接。
1.同种限制酶切割产生的黏性末端一定相同。
2.不同限制酶切割产生的黏性末端是可能相同。
一个酶切位点，产生2个端口，断开2个磷酸二酯键，消耗2分子水，新增2个游离磷酸
作用：形成磷酸二酯键，连接DNA片段。
E.coliDNA连接酶 只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间连接起来，不能将双链DNA片段之间进行连接。
T4DNA连接酶 既可以连接双链DNA片段互补的黏性末端，又可以连接双链DNA片段的平末端，但连接平末端之间的效率比较低。
作用： 携带外源DNA片段进入受体细胞
定义：质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的很小的双链环状DNA分子。
双链环状：质粒有0个游离的磷酸基团
在进行基因工程操作中，真正被用作载体的质粒，都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的
有一个至多个限制酶切割位点，便于外源DNA片段插入
能在受体细胞中进行自我复制，或整合到受体DNA上，随受体DNA同步复制。（质粒在宿主细胞内不一定要整合到宿主细胞内× 细菌细胞不用整合）
具有标记基因（人工改造），便于DNA分子的鉴定和筛选 —如：抗菌素的抗性基因、产物有颜色的基因产物、能发出荧光的基因等
无毒无害
利用病毒对宿主细胞的侵染性
病毒对宿主细胞的侵染具有一定的 物种（组织）特异性。
工具≠工具酶、工具酶≠质粒、质粒≠细胞器
化学本质：蛋白质
功能：协助细胞膜控制物质进出细胞
化学本质：可以是DNA分子，如 质粒。可以是生物，如动植物病毒。也可是λ噬菌体的衍生物。
功能：“分子运输车”,把目的基因导入受体细胞
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