8-细菌学-微生物学检验-第一章-细菌检验基础技术
碱性亚甲蓝，结晶紫，及碱性复红
伊红，酸性复红及刚果红
瑞士染液中的伊红亚甲蓝，吉姆萨染液中的伊红天青
细胞壁学说：革兰阳性菌细胞壁结构较紧密，肽聚糖层厚，脂质含量少，乙醇不宜透入
等电点学说
化学学说
初染（结晶紫1min）、媒染（碘液1min）、脱色（95%酒精30s）、复染（复红30s）
碳酸复红，加热5min
3%酸性酒精
吕氏美蓝复染
子主题1
负染色
鞭毛染色
1%结晶紫染液
20%硫酸铜冲洗
结果为菌体深紫色，荚膜为无色/浅紫色
适合各类菌生长
适于含有奈瑟菌属、嗜血杆菌属细菌标本的接种
SS 琼脂平板（选择，鉴别）
鉴别： 伊红亚甲蓝（EMB）琼脂平板、麦康凯（MAC）琼脂平板、糖发酵管、克氏双糖铁琼脂（KIA）
用于对血液、骨髓及无菌体液等标本进行增菌培养，以提高阳性检出率
用于从粪便中分离霍乱弧菌及其他弧菌
无菌技术是指防止微生物进入物品或机体，同时防止待检物中可能存在的病原微生物污染环境及周围环境及工作人员的规范化操作技术
分区划线法
连续划线法
纯种增菌及保存菌种
固体培养基上生长现象：、大小、形状、凸起或扁平、凹陷、边缘、透明度
细菌的生化反应试验是指各种细菌所具有的的酶不完全相同，对营养物质的分解能力亦不一致，因而其代谢产物有别。根据此特点，利用生物化学方法来鉴别不同细菌称为细菌的生化反应试验。
肠杆菌科细菌的鉴定：
氧化-发酵试验（O-F试验），又称Hugh-Leifson试验
细菌分解葡萄糖，必须有分子氧参加的称为氧化型；可以进行无氧降解的称为发酵型；不分解葡萄糖的称为产碱性
Hugh-Leifson培养基（含酸碱指示剂）
此试验可区分细菌的代谢类型。肠杆菌科细菌为发酵型，也可用于葡萄球菌属（发酵葡萄糖）与微球菌属（氧化葡萄糖）的鉴别
生成黄色
主要用于迟缓发酵乳糖菌株的快速鉴定
培养基呈现黑色
七叶苷培养基、胆汁七叶苷培养基
主要用于鉴别D群链球菌与其他链球菌
红色即阳性，黄色为阴性
葡萄糖蛋白胨水培养基
主要用于大肠埃希菌（阳性）和产气肠杆菌（阴性）的鉴别
红色即为阳性
葡萄糖蛋白胨水培养基
常与甲基红试验联合应用。前者为阳性的细菌，后者多为阴性。某些细菌如奇异变形杆菌，35℃培养可出现同时阳性
红色的玫瑰吲哚为阳性
蛋白胨水培养基
主要用于肠杆菌科的细菌的鉴定
生成黑色硫化物
醋酸铅培养基，KIA，TSI琼脂
主要用于肠杆菌科的鉴别
酚红指示剂变红
尿素培养基
主要用于肠杆菌科的变形杆菌属、摩根菌属、和普罗威登菌属的鉴定
绿色化合物，若延长反应时间，会引起褪色。
主要用于肠杆菌科细菌的鉴别
氨基酸脱羧酶试验
铵盐为唯一氮源，枸橼酸盐为唯一碳源，培养基变碱，
枸橼酸盐培养基
有助于肠杆菌科细菌的鉴定。
丙二酸盐为唯一碳源，培养基变碱。
有助于肠杆菌科细菌的鉴定。
铵盐为唯一氮源，醋酸盐为唯一碳源，培养基变碱。
埃希菌属阳性，志贺菌属阴性
形成紫色化合物，
主要用于链球菌的鉴定，B群阳性，其余链球菌阴性
用于非发酵菌的鉴定
主要用于肠杆菌科和非发酵菌的鉴定
3%过氧化氢溶液
主要用于革兰阳性球菌的初步鉴定，葡萄球菌属和微球菌属触酶试验阳性，链球菌属触酶试验阴性
常用于细菌的鉴定，
鉴定葡萄球菌致病性的重要指标，金黄葡产凝固酶，表皮和腐生葡萄球菌凝固酶阴性
菌落周围形成乳白色混浊环
主要用于厌氧菌的鉴定。
出现透明环
阳性球菌中金黄色葡萄球菌产生DNA酶，肠杆菌科中沙雷菌和变形杆菌可产生DNA酶
主要用于肺炎链球菌（阳性）和α链球菌（阴性）的鉴别。
在B群链球菌和葡萄球菌生长线交界处溶血力增加，出现箭头型透明溶血环
血琼脂平板
主要用于鉴定B群链球菌（阳性），其他链球菌阴性
氢氧化钾拉丝试验
用于鉴定A群链球菌与其他链球菌
用于肺炎链球菌与其他链球菌的鉴别
O/129抑菌试验
KIA或TSI琼脂培养基
主要用于肠杆菌科细菌的初步鉴别
MIU培养基
常用于肠杆菌科细菌的鉴定
抗原检测
肠热症的肥达试验，斑疹伤寒外斐试验
分子生物学检验技术
鲎试验
体内毒力实验
体外毒力试验
PCT可以作为细菌感染的标志物
五、细菌检验的自动化
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